会员登录
当前位置: 热点排行
DNA聚合酶简介
发布日期:2013-12-3
      影响PCR特异性的因素很多,包括模板、引物性质及质量、反应条件的控制等等,而高特异性Tap酶的出现大

大减少了摸条件这一烦琐的实验过程,也为PCR产物快速有效的纯化(如用DNA产物纯化试剂盒)打下了基础合理

选择耐热 DNA 聚合酶是 PCR 成败与否的一个关键因素。如何选择最合适的耐热 DNA 聚合酶,是用户首先考虑的

问题。目前市面上有许多种耐热 DNA 聚合酶,虽然名称各不相同,但主要区别在于特异性、保真性、耐热性、扩

增速率、扩增片段长度等几个指标。

      华科生物的六种耐热 DNA 聚合酶全部采用国外生产工艺和质量检测标准,是经过多次分子筛、离子交

换层析术纯化的超纯型产品,去除宿主 DNA 和蛋白酶等因素的影响,特异性非常好且特别稳定,经检测,室温放置

 1 个月,活性不发生改变。

六种耐热 DNA 聚合酶性能介绍

Taq

扩增效率最高的耐热 DNA 聚合酶,能很好地扩增 6 kb 以下的 DNA 片段。

rTaq

对表达Taq菌株进行改造,扩增效率优于Taq,能很好地扩增6Kb以下的DNA片段,

效率与TakararTaq相仿。

Taqm  

对表达Taq酶的菌株进行基因工程改造,表达一个64kD的小分子蛋白,比活性和扩增效率高于Taq

Pfu

目前保真度最高的耐热 DNA 聚合酶,但扩增效率低于 Taq 酶,能很好的扩增 2 kb 以下的片段。

一般用于点突变、基因筛选等对保真性要求很高的 DNA  扩增。

Taq Plus

集扩增效率高和保真度于一体。能有效地扩增 10 kb 以下的片段,扩增效率比 Pfu 高,保真度

Taq 好。对于有些结构复杂的模板,如 GC 含量高、有二级结构等可选用 Taq Plus 扩增。

HotStart Taq

经过化学修饰的耐热 DNA 聚合酶。此酶在常温下,活性被封闭,要在94-95℃加热数分钟才能恢复

正常活力开始反应,避免了起始循环较低温度下的非特异性扩增,提高了 PCR 反应的灵敏度及特异

性。一般用于扩增基因组等复杂模板,可大大提高 PCR 扩增的特异性。

Long Taq

具有3-5′外切酶活性的耐热 DNA 聚合酶,它不但扩增效率高而且错配率低,对简单模板可扩增长达40 kb的片段,对复杂模板也可扩增长达15 kb的片段,特别适合于长片段扩增,如构建基因图谱及分子遗传学研究等。

几种耐热 DNA 聚合酶的比较(HotStart Taq实为Hotstart试剂+其他五种Taq酶)

简介

保真性能

扩增效率

扩增长度

价格

Taq

超纯高效率耐热

DNA聚合酶

+

+

+

+

rTaq

超纯高效率耐热

DNA聚合酶

+

++

+

++

Taqm  

超纯高效率耐热

DNA聚合酶

+

++

+

++

Pfu

超纯高保真耐热

DNA聚合酶

++++

++

++

+++

Taq Plus

超纯高效率、高保真

耐热DNA聚合酶     

+++

++++

+++

++

Long Taq

超纯长片段

耐热DNA聚合酶

+

++++

+++

++++

HotStart Taq

超纯特异性最强的

耐热DNA聚合酶

上表用不同的+来区分,只是一个区别的表示,不代表其性能的准确差异,具体的性能参数请参照每一种的详细介绍,所有的酶都能满足我们常规PCR的需要,针对您更高的实验目的,可以有更加理想的选择方案。Hotstart Taq:为Hotstart试剂+其他五种Tap酶,特异性和灵敏度都比单独的其他五种酶有所提高,因此它的各项指标只需参照不同酶部分介绍,为了制表考虑,用?代表。

其它技术参数指标

5-3’外切

3-5’外切

可否直接

TA克隆

适用范围

Taq

一般 用于<6kb的对保真度不高的DNA产物的扩增、引物延伸、序列测定、DNA平末端加A

r Taq

一般 用于<6kb的对保真度不高的DNA产物的扩增、引物延伸、序列测定、DNA平末端加A

Taqm  

一般 用于<6kb的对保真度不高的DNA产物的扩增、引物延伸、序列测定、DNA平末端加A

Pfu

用于DNA的高保真扩增,如基因表达克隆、基因定点突变、细胞内基因点突变的分析(SNP)和末端补平等

Taq Plus

常用于一些保真度高,结构复杂的模板如GC含量高,有二级结构等扩增,大多数情况下可替代Tap DNA聚合酶

HotStart Taq

一般用于高灵敏度和有较强背景的基因组扩增

(如基因组中某个特定基因位点或外源病原体的检测)、DNA需类测定、Multiplex PCXTA克隆等。

Long Taq

适合于保真度要求高的长片段及一些复杂模板(如含二级结构,富含GC序列和重复序列等)的扩增,如构建基因图谱、测试及分子遗传学研究等。

上一篇:Qiagen 超低折扣进行中!    下一篇:PCR产品选择指南
地址: 北京市海淀区北洼路28号商住楼4-402
电话: 010-60609846             传真: 010-60609846
网址: www.huakebio.com         Email: support@huakebio.com
京ICP备13051294    华科众信科技© 版权所有