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核酸提取与纯化 超纯质粒DNA小量提取试剂盒
编号:HK111-2 规格:100T
厂家:华科自产 价格:300元
 
产品介绍:

采用碱裂解-中和法,使含有质粒DNA 的上清通过设计独特的离心吸附柱式结构时, 被特殊硅基质材料高效、专一地吸附。随后可用洗脱缓冲液从离心吸附柱上洗脱下来。

30分钟完成一次实验, 操作简便。

省略苯酚、氯仿的抽提, 减少了对质粒DNA的破坏。 2-3ml菌液可提取出约15-20μg质粒DNA, 其中超螺旋结构占95%以上,可用作测序模板,转染和其它酶促反应。纯度与CsCl密度梯度离心相仿,OD260/280=1.8.

样品起始量:(起始量与菌体浓度有关:菌体浓度高,起始量低一点;反之亦然。)1-5ml(LB,高拷贝);5-10ml(LB,低拷贝); 2ml(TB,高拷贝);2-5ml(TB,低拷贝)

柱吸附力:50ug, 对于同一种质粒,吸附柱可以反复使用多次。

得率:第一次洗脱的得率为85%。第二次洗脱的得率>95%

保存及注意事项:    18-25℃,常规室温保存

使用试剂盒前, 请在每5mI溶液I中加入300μl RNaseA 使RnaseA终浓度达到0.6mg/ml。溶液I使用完毕后, 请立即置于4℃保存。 如果溶液I使用放置时间过长(超过两个月), 提取的质粒可能会有RNA污染。这时可于提取的质粒中加入0.2-0.5μl RNaseA(10mg/ml), 室温放置3-5分钟, 即可除尽RNA的污染。此操作不会影响其它后续实验。

浓缩漂洗液在使用前请按照1:3的比例加入无水乙醇, 例如15mI浓缩漂洗液中加入45mI无水乙醇,混匀后方可使用。

每次提取质粒实验之前, 请检查溶液II及结合缓冲液是否有高盐结晶。如有结晶,请将其瓶盖拧松后置于微波炉中档连续加热10-15, 高盐结晶充分溶解后再使用。确保每使用完一种试剂后,立即盖紧该试剂瓶的瓶盖。

试剂盒组成

100

STE缓冲液(溶液1)

Lysis Buffer(溶液2) 

3M NaAc,pH 4.8(溶液3)   

结合缓冲液     

去内毒素漂洗液      

浓缩漂洗液     

洗脱缓冲液     

B型吸附柱/废液收集管  

RNaseA (10mg/ml)    

10ml

15ml

15ml

45ml

60ml

3X15ml

10ml

100

600ul

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